血清分離膠與紅細(xì)胞分離出現(xiàn)的不良現(xiàn)象分析

時間：2021-05-20作者：武漢德晟生化科技有限公司瀏覽：63

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• 詞條

  詞條說明

• WB實驗失敗是否與緩沖劑有關(guān)

  近期了解到有實驗人員反應(yīng)，作WB實驗有失敗的情況，懷疑與實驗中使用的緩沖劑有關(guān)，可能是緩沖劑未滅菌或配制成溶液后感染了細(xì)菌導(dǎo)致的。那么WB實驗的失敗是否真的與緩沖劑染菌造成的呢？ WB實驗即western blot蛋白質(zhì)印跡實驗，或稱為免疫印跡實驗，是將電泳分離后的細(xì)胞或組織中蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。WB實驗失敗的原因有

• 如何制備HEPES緩沖液？這里有多種方法！

  Hepes是一種通用的兩性離子緩沖劑，不結(jié)合鎂，鈣，錳或銅離子。其中細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用的緩沖液強度通常在10至25mm之間，在加入Hepes后，用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH。必須注意保持培養(yǎng)基中的重量克分子滲透壓濃度，并且需要評估對于給定細(xì)胞系的毒性。根據(jù)文獻得到，HEPES在控制pH方面優(yōu)于碳酸氫鈉。 Hepes的緩沖液可以通過好幾種方法來制備，可以將游離酸添加到水中，然后用大約一半摩爾當(dāng)量的氫氧化鈉或

• 乙二胺四乙酸 (EDTA) 體外抗凝劑的作用

  在醫(yī)院的一些臨床檢驗中，使用全血或血漿檢查，通常采集靜脈血做檢查標(biāo)本，根據(jù)不同的檢查需求，也會添加不同的抗凝劑。在體外診斷的特定領(lǐng)域中，通常將抗凝劑添加到采血管中防止血液凝固形成血凝塊，以保持血液的流動性方便進行血液檢測。乙二胺四乙酸 (EDTA) 是一種多元酸，含有四個羧酸基團和兩個胺基團，帶有孤對電子，可螯合鈣和其他幾種金屬離子。鈣是凝血級聯(lián)的各種酶反應(yīng)的必需物質(zhì)，EDTA與鈣離子結(jié)合形成螯合

• 正確選擇緩沖液Tris、HEPES和PIPES及注意事項

  如何選擇緩沖區(qū) 選擇緩沖區(qū)時，重要的是要考慮每個緩沖區(qū)的優(yōu)缺點。首先，您計劃在實驗中使用的試劑的pH范圍必須與您選擇的緩沖液的pH范圍一致。其次，您必須考慮濃度，緩沖液毒性，溫度和反應(yīng)性。緩沖液的濃度必須足以說明您計劃在實驗中使用的酸或堿的量。您計劃使用的pH改變成分越多，所需的緩沖液濃度就越高。緩沖液毒性非常重要，因為某些緩沖液可能會對正在使用的細(xì)胞產(chǎn)生毒性，因此，如果不確定毒性，可以在實驗中使